RIASSUNTO E SPIEGAZIONE DEL TEST
La malaria è una malattia febbrile, emolitica e trasmessa dalle zanzare che infetta oltre 200 milioni di persone e uccide più di 1 milione di persone all'anno.È causata da quattro specie di Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale e P. malariae.Tutti questi plasmodi infettano e distruggono gli eritrociti umani, producendo brividi, febbre, anemia e splenomegalia.P. falciparum causa malattie più gravi rispetto alle altre specie plasmodiali e rappresenta la maggior parte dei decessi per malaria.P. falciparum e P. vivax sono i patogeni più comuni, tuttavia esiste una notevole variazione geografica nella distribuzione delle specie.
Tradizionalmente, la malaria viene diagnosticata mediante la dimostrazione dei microrganismi su spessi strisci di sangue periferico colorati con Giemsa e le diverse specie di plasmodio si distinguono per la loro comparsa negli eritrociti infetti.La tecnica è in grado di fornire diagnosi accurate e affidabili, ma solo se eseguita da esperti microscopisti utilizzando protocolli definiti, il che presenta grossi ostacoli per le aree remote e povere del mondo.
Il test rapido Malaria Pf/Pv Ag è stato sviluppato per risolvere questi ostacoli.Utilizza anticorpi specifici per P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) e per P. vivax lattato deidrogenasi (Pv-LDH) per rilevare e differenziare simultaneamente l'infezione da P. falciparum e P. vivax.Il test può essere eseguito da personale non addestrato o minimamente qualificato, senza attrezzatura di laboratorio
PRINCIPIO
Il test rapido Malaria Pf/Pv Ag è un immunodosaggio cromatografico a flusso laterale.I componenti del test della striscia sono costituiti da: 1) un tampone coniugato di colore bordeaux contenente anticorpo murino anti-Pv-LDH coniugato con oro colloidale (coniugati Pv-LDH-oro) e anticorpo murino anti-pHRP-II coniugato con oro colloidale (pHRP-II-coniugati oro), 2) una striscia di membrana di nitrocellulosa contenente due bande di test (bande Pv e Pf) e una banda di controllo (banda C).La banda Pv è pre-rivestita con un altro anticorpo murino specifico anti-Pv-LDH per il rilevamento dell'infezione da Pv, la banda Pf è pre-rivestita con anticorpi policlonali anti-pHRP-II per il rilevamento dell'infezione da Pf e la banda C è rivestita con IgG di capra anti-topo.
Durante l'analisi, un volume adeguato del campione di sangue viene dispensato nel pozzetto del campione (S) della cassetta del test, un tampone di lisi viene aggiunto al pozzetto del tampone (B).Il tampone contiene un detergente che lisa i globuli rossi e rilascia vari antigeni, che migrano per azione capillare attraverso la striscia contenuta nella cassetta.Il Pv-LDH, se presente nel campione, si legherà ai coniugati Pv-LDH-oro.L'immunocomplesso viene quindi catturato sulla membrana dall'anticorpo anti-Pv-LDH pre-rivestito, formando una banda Pv di colore bordeaux, che indica un risultato del test Pv positivo.In alternativa, il pHRP-II, se presente nel campione, si legherà ai coniugati pHRP-II-oro.L'immunocomplesso viene quindi catturato sulla membrana dagli anticorpi anti-pHRP-II pre-rivestiti, formando una banda Pf di colore bordeaux, che indica un risultato positivo del test Pf.L'assenza di bande di test suggerisce un risultato negativo.Il test contiene un controllo interno (banda C) che dovrebbe presentare una banda di colore bordeaux dell'immunocomplesso di coniugati anti-IgG di topo di capra / IgG di topo (anti-Pv-LDH e anti-pHRPII)-oro, indipendentemente dallo sviluppo del colore su una qualsiasi delle bande del test.In caso contrario, il risultato del test non è valido e il campione deve essere testato nuovamente con un altro dispositivo.
