RIASSUNTO E SPIEGAZIONE DEL TEST
La malaria è una malattia febbrile, emolitica e trasmessa dalle zanzare che infetta oltre 200 milioni di persone e uccide più di 1 milione di persone all'anno.È causata da quattro specie di Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale e P. malariae.Tutti questi plasmodi infettano e distruggono gli eritrociti umani, producendo brividi, febbre, anemia e splenomegalia.P. falciparum causa malattie più gravi rispetto alle altre specie plasmodiali e rappresenta la maggior parte dei decessi per malaria, ed è uno dei due più comuni agenti patogeni della malaria.
Tradizionalmente, la malaria viene diagnosticata mediante la dimostrazione dei microrganismi su spessi strisci di sangue periferico colorati con Giemsa e le diverse specie di plasmodio si distinguono per la loro comparsa negli eritrociti infetti.La tecnica è in grado di fornire diagnosi accurate e affidabili, ma solo se eseguita da esperti microscopisti utilizzando protocolli definiti, il che presenta grossi ostacoli per le aree remote e povere del mondo.
Il test rapido Pf Ag è stato sviluppato per risolvere questi ostacoli.Rileva l'antigene specifico Pf pHRP-II nel campione di sangue umano.Può essere eseguito da personale non addestrato o minimamente qualificato, senza attrezzature di laboratorio.
PRINCIPIO
Il test rapido Pf Ag è un immunodosaggio cromatografico a flusso laterale.I componenti della striscia reattiva sono costituiti da: 1) un tampone coniugato di colore bordeaux contenente anticorpo monoclonale anti-PHRP-II coniugato con oro colloidale (pHRP II-coniugato oro), 2) una striscia di membrana di nitrocellulosa contenente una banda del test (Pf) e una banda di controllo (banda C).La banda Pf è pre-rivestita con anticorpi policlonali anti-pHRP-II e la banda C è pre-rivestita con IgG di capra anti-topo.
Durante l'analisi, un volume adeguato del campione di sangue viene dispensato nel pozzetto del campione (S) della cassetta del test, un tampone di lisi viene aggiunto al pozzetto del tampone (B).Il tampone contiene un detergente che lisa i globuli rossi e rilascia l'antigene pHRPII, che migra per azione capillare attraverso la striscia contenuta nella cassetta.Il pHRP-II, se presente nel campione, si legherà ai coniugati pHRP-II-oro.L'immunocomplesso viene quindi catturato sulla membrana dagli anticorpi policlonali antipHRP II pre-rivestiti, formando una banda Pf di colore bordeaux, che indica un risultato del test Pf positivo.
L'assenza della banda Pf suggerisce un risultato negativo.Il test contiene un controllo interno (banda C) che dovrebbe presentare una banda di colore bordeaux dell'immunocomplesso di IgG anti-topo di capra / IgG di topo (pHRP II–coniugati oro) indipendentemente dallo sviluppo del colore su una qualsiasi delle bande Pf.In caso contrario, il risultato del test non è valido e il campione deve essere testato nuovamente con un altro dispositivo.
