SOMMARIO E SPIEGAZIONE IL TEST
La leishmaniosi viscerale, o Kala-azar, è un'infezione disseminata causata da diverse sottospecie di L. donovani.Secondo le stime dell’Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS), la malattia colpisce circa 12 milioni di persone in 88 paesi.Si trasmette all'uomo attraverso la puntura dei flebotomi Phlebotomus, che contraggono l'infezione nutrendosi di animali infetti.Sebbene sia una malattia diffusa nei paesi poveri, nell'Europa meridionale è diventata la principale infezione opportunistica tra i pazienti affetti da AIDS.L'identificazione del microrganismo L. donovani nel sangue, nel midollo osseo, nel fegato, nei linfonodi o nella milza fornisce un mezzo diagnostico definitivo.Rilevazione sierologica degli anticorpi anti-L.donovani IgM è risultato essere un eccellente marcatore della leishmaniosi viscerale acuta.I test utilizzati in clinica includono ELISA, anticorpi fluorescenti o test di agglutinazione diretta 4-5.Recentemente, l'utilizzo della proteina specifica di L. donovani nel test ha migliorato notevolmente la sensibilità e la specificità.
Il test rapido Leishmania IgG/IgM Combo è un test sierologico a base di proteine ricombinanti che rileva simultaneamente gli anticorpi IgG e IgM contro L. Donovani.Il test fornisce un risultato affidabile entro 15 minuti senza strumenti.
PRINCIPIO
Il test rapido Leishmania IgG/IgM è un test immunocromatografico a flusso laterale.La cassetta del test è composta da: 1) un tampone coniugato di colore bordeaux contenente antigene ricombinante di L. donovani coniugato con oro colloidale (coniugati di Leishmania) e coniugati IgG di coniglio-oro, 2) una striscia di membrana di nitrocellulosa contenente due bande test (bande T1 e T2). e una banda di controllo (banda C).La banda T1 è pre-rivestita con anti-IgM umane monoclonali per la rilevazione degli anti-L.donovani IgM, la banda T2 è prerivestita con reagenti per la rilevazione degli anticorpi anti-L.donovani IgG e la banda C è prerivestita con IgG anti-coniglio di capra.
Quando un volume adeguato di campione viene dispensato nel pozzetto del campione della cassetta, il campione migra per azione capillare attraverso la cassetta.Le IgM L. donovani, se presenti nel campione, si legheranno ai coniugati di Leishmania.L'immunocomplesso viene quindi catturato sulla membrana dall'anticorpo IgM anti-umano pre-rivestito, formando una banda T1 di colore bordeaux, che indica un risultato positivo del test IgM anti-L. donovani.Le IgG di L. donovani, se presenti nel campione, si legheranno ai coniugati di Leishmania.L'immunocomplesso viene quindi catturato dai reagenti pre-rivestiti sulla membrana, formando una banda T2 di colore bordeaux, che indica un risultato positivo del test per L. donovani IgG.
L'assenza di bande T (T1 e T2) suggerisce un risultato negativo.Il test contiene un controllo interno (banda C) che dovrebbe mostrare una banda di colore bordeaux dell'immunocomplesso del coniugato IgG anti coniglio di capra/IgG di coniglio-oro indipendentemente dallo sviluppo del colore su una qualsiasi delle bande T.In caso contrario, il risultato del test non è valido e il campione deve essere nuovamente testato con un altro dispositivo.
